HPLC液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜及液-固色譜。由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與液相柱色譜裝置比較,具有GX、快速、靈敏等特點(diǎn)。為了保證新手也能較好地使用HPLC液相色譜儀,新手需要對其核心使用技巧有一定的了解,下面我們來具體說說。
1.過濾流動(dòng)相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。
2.對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3.打開HPLC工作站(包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀),連接好流動(dòng)相管道,連接檢測系統(tǒng)。
4.進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單。
5.有一段時(shí)間沒用,或者換了新的流動(dòng)相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,需要在manua1菜單下,先點(diǎn)擊purge, 再點(diǎn)擊start,沖洗時(shí)速度不要超過10 ml/min。
6.調(diào)節(jié)流璽,初次使用新的流動(dòng)相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,-般不要超過2000。點(diǎn)擊injure,選用合適的流速,點(diǎn)擊on,走基線,觀察基線的情況。
7.設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file;選取select users and methods, 可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法,點(diǎn)擊new method。 選取需要的配件,包括進(jìn)樣閥,泵,檢測器等,根據(jù)需要而不同。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括: a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,- 般2-5分鐘; b.基線歸零; c. 進(jìn)樣閥的loading - inject轉(zhuǎn)換; d. 走樣時(shí)間,隨不同的樣品而不同。
8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法,點(diǎn)擊starto 進(jìn)樣,**的樣品均需過濾。方法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走-段基線,洗掉剩余物。
9.關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)液相色譜。
10.填寫登記本,由負(fù)責(zé)人簽字。
以上就是HPLC液相色譜儀的核心使用技巧,希望能幫助大家更好地使用它。